國立中央大學實驗動物照護及使用委員會(IACUC)止痛麻醉術前術後照護規範教案

國立中央大學實驗動物照護及使用委員會(IACUC)

實驗動物止痛、麻醉、術前與術後照顧的規範

目的:

此規範的目的在確保術後的嚙齒類實驗動物得以順利恢復。同時讓動物使用者可於疼痛發生時採取適當的措施。

規範內容:

2.1存活性手術:

次要存活性手術:指不侵入體腔或對身體機能且不會造成永久性之損傷的手術。操作條件較不嚴苛，但仍須符合無菌操作標準，並給予適當的麻醉。
主要存活性手術:指侵入頭顱、腹腔或胸腔的手術或對身體機能造成永久性之損傷的手術。執行時，除了必須無菌操作同時也須盡可能降低術後感染的機會。

2.2 囓齒類實驗動物次要存活性手術:

所有器械應於手術前完成消毒。(最好是用包巾包覆器械容器，以高溫高壓壓力容器進行消毒)
手術操作區需以70%酒精或四級胺類消毒劑進行消毒。
動物必須沒有任何臨床症狀。
手術區域的毛髮應於術前剔除乾淨，同時應清潔皮膚，並以70%酒精或手術專用碘液進行消毒。
手術操作人員應穿戴無菌手套、手術口罩及頭套。若連續進行多項手術，應於不同手術間更換手套。

囓齒類實驗動物主要存活性手術:

動物準備:評估健康狀態；動物必須沒有任何臨床症狀；由於大鼠與小鼠無發生術間或術後嘔吐的危險，故無需禁食。但若是與消化道有關的手術，禁食幾個小時方可進行手術。
術前準備:

進行囓齒類實驗動物手術時不一定需要獨立的空間，但至少應為一個整齊的且不是很多人往來經過的區域，以利無菌操作進行。
手術桌面與器械必須徹底消毒。
手術操作人員應使用適當的麻醉以確實阻斷疼痛反射。動物必須秤重以估算正確的麻醉用量。
以50-100mg/kg ketamine+5-15mg/kg xylazine的劑量進行腹腔注射，麻醉時間少於30分鐘。如果必須延長手術時間，可追加給予原劑量的1/10-1/3。氣體麻醉如isoflurane需要有適當的抽風排除系統，以確保研究人員的安全。Sodium pentobarbital以30-40mg/kg的劑量進行腹腔注射。
麻醉期間，應維持動物正常體溫。大鼠與小鼠有較高的體表面積，因此散熱較快。手術期間動物發生死亡的主要原因，常為體溫過低所致，不在麻醉或手術本身。建議可以使用循環式溫水毯或保溫燈以保持動物體溫。
剔除手術區域周圍的毛髮，以避免毛髮造成汙染。剔除過大範圍的毛髮會降低動物體溫調節的能力，應避免。
手術區域的消毒至少有2個步驟。建議先以70%酒精擦拭，接著以碘液塗佈於手術區域皮膚表面。(以同心圓方式向外擦拭消毒)避免將動物的全身皮膚都弄濕，否則可能造成動物體溫過低，甚至死亡。
術間建議塗抹無菌眼藥膏於動物雙眼，以避免手術過程中角膜乾燥受損。
執行手術的人員應於術前用抗菌劑刷手。術者與相關助手，均應穿戴無菌手套、口罩及頭套，並務必穿著乾淨的實驗衣或刷手服。

手術:

術間動物應維持在適合手術的麻醉狀態，並隨時監控麻醉深度，例如可定期觀察呼吸、黏膜顏色及捏動物腳趾反射。
手術過程中所有用到的器械及材料均應滅菌。
為了避免創口及手術器械受到汙染，應在動物體表覆蓋創巾。創巾應覆蓋動物的所有暴露區域，包括尾巴及四肢。
每10分鐘監控與評估動物的生命表徵。
選擇適用的方法與材料縫合創口。用於皮膚的縫線應使用無毛細現象且為不可吸收性的材質，以降低術後感染風險。用於肌肉層或黏膜等之縫線，應使用可吸收的縫線材質如鉻線。

術後照顧:

將動物移到溫暖、乾燥的場所，並持續觀察動物恢復時的生命表徵(例如呼吸與黏膜顏色)。
可由皮下提供輸液(乳酸林格氏液 40-80ml/kg/24hr)，並提供保暖以利術後動物的恢復，也可在鼠籠內放置微濕的飼料。
將術後觀察的結果記錄於術後觀察記錄表。手術紀錄表與術後觀察記錄表可自行設計，但內容至少應包括:IACUC No.、手術日期、動物體重、麻醉劑使用、止痛劑使用、動物呼吸、活動力、傷口之觀察。
依據實驗計畫書投予止痛劑，並記錄於術後觀察記錄表。建議術前投予止痛劑。
在動物完全由麻醉狀態恢復後，才可以將動物送回原飼育房舍。該動物的鼠籠應明顯標示，以利獸醫師在術後2天內追蹤動物的健康狀況。
術後3天內，應至少每天檢查一次動物，檢查項目包括縫合的創口紅腫的狀況，或是創口有無分泌物，動物的飲食、泌尿、排便狀況等。
術後10-14天，拆除皮膚的縫線或皮釘。
當發現術後併發症(如感染或恢復期拖長)，應立即與獸醫師聯繫。

參考資料:

實驗動物管理及使用指南第三版(擴充版)，民國99年12月，中華實驗動物學會出版。
實驗動物福祉:評估並緩解實驗動物的疼痛與痛苦。羅安堡、秦咸靜翻譯。中華實驗動物學會發行。

表單:

囓齒類疼痛評估紀錄表。

國立中央大學實驗動物照護及使用委員會(IACUC)

疼痛評估記錄表-囓齒類

IACUC NO:

PI:

手術日期:

負責人員:

聯絡電話:

動物編號: □ 腫瘤觀察

飼養籠位: □已加掛牌

動物性別: □ 微生物感染

疼痛分級：__________。動物觀察: __________天，至_________________(mm/dd)。

評估項目

日期/分數

傷口

狀況

正常

滲出液或血液

膿樣分泌物

行為

正常

活動力降低，持續躲藏於角落

焦慮不安、呼吸急促，持續舔咬傷口或自殘

人接近時發出叫聲甚至出現攻擊行為

食慾

正常

飼料未吃完

飼料不吃且對零食無興趣

排便

正常

排便量減少或異常

無排便

排尿

正常

排尿量減少或異常

未排尿

疼痛

分數

第一級:眼眶大小正常，臉頰飽滿往外展平，鼻頭部呈”U”型，耳朵豎直呈圓柱狀

第二級:眼眶縮小，眼皮微閉，臉頰微往內凹陷;鼻頭部由”U”變成微”V”型，耳朵微垂往後

第三級:眼眶幾乎消失，雙眼緊閉，兩側臉頰凹陷，鼻頭部呈”V”型，耳多癱軟，平貼於背部

總分

0-13

注射

(mL)

Buprenorphine (鴉片類)，Ketoprofen(非鴉片類)

Nalbuphine(類鴉片類) ，Flunixine(非鴉片類)

PS:填寫縮寫代號K,B,N ex: B/2 mL

口服

(Tab.)

Ketoprofen(非鴉片類), Meloxicam(非鴉片類)

PS:填寫縮寫代號K,M, ex: K/2 tab

觀察者簽名

疼痛等級

正常：0-3分，疼痛等級第1級:不給藥仍需持續觀察。

輕度疼痛：4-6分，疼痛等級第2級：給予非鴉片類止痛劑。

中度疼痛：7-10分，疼痛等級第3級：每8-12小時給一次鴉片類止痛藥。

重度疼痛：11-13分，疼痛等級第4級：顯示動物處於極度疼痛狀態，每8-12小時給一次鴉片類止痛藥且考慮

合併用藥。

藥品備註(藥名/劑量/給藥途徑/單位含量)

Buprenorphine：0.05mg/kg(0.01-0.05 mg/kg/q6-12h) SC, IM

Meloxicam:1-2 mg/kg/q24h PO, SC

Ketoprofen：3mg/kg(2-5 mg/kg/q24h), SC ; 12.5mg/m1

Carprofen：5mg/kg(1-2.2 mg/kg/q12h), PO,

Meloxicam:1-2 mg/kg/q24h, SC/IM ; 10mg/ml

Morphine 2-5 mg/kg q. 2-4 h SC, IM

Nalbuphine:1-2 mg/kg IM

Flunixine：1.1 mg/kg SC IM

Ibuprofen: 2-7.5 mg/kg q. 12-24 h PO

Butorphanol: 0.1-0.5 mg/kg q. 4 h SC, IM

簽核
管理人員		計畫主持人		獸醫師

註:

實驗小暑進行手術後或接種腫瘤或微生物感染，需填寫此紀錄表。
術後照護以3-7天為原則。(術後止痛劑施打，至少需2天)
腫瘤觀察，以單一飼育盒為原則。(若有需要，可施打止痛劑)
微生物感染，以單一飼育盒為原則。(若有需要，可施打止痛劑)
此紀錄表填寫完畢後，交予動物中心飼養管理員，進行後續簽核。